رسالة جامعية
Elaboration d'un outil de modification génétique au locus Dct dans les cellules souches embryonnaires de souris à l'aide de la méganucléase I-SceI
| العنوان: | Elaboration d'un outil de modification génétique au locus Dct dans les cellules souches embryonnaires de souris à l'aide de la méganucléase I-SceI |
|---|---|
| المؤلفون: | Fenina, Myriam |
| بيانات النشر: | Université Pierre et Marie Curie - Paris VI, 2011. |
| سنة النشر: | 2011 |
| المجموعة: | CCSD theses-EN-ligne, France |
| Original Material: | 2011PA066491 |
| مصطلحات موضوعية: | [SDV:GEN] Life Sciences/Genetics, Recombinaison homologue, I-SceI, méganucléase, Dct, cellule souche embryonnaire, ciblage de gène |
| الوصف: | De nombreux gènes sont surexprimés au cours de la progression du mélanome malin cutané. Pour mieux comprendre le rôle de ces gènes, des études fonctionnelles sont nécessaires. Mon projet visait à développer une nouvelle stratégie pour produire des souris portant n'importe quel ADN d'intérêt inséré à la place du premier exon du gène Dct. Dct code la dopachrome tautomérase, une enzyme de la voie de biosynthèse de la mélanine, exprimée de façon spécifique dans les mélanocytes et leurs précurseurs. Notre stratégie visait à augmenter la fréquence de recombinaison homologue au locus Dct dans des cellules souches embryonnaires (ES) en induisant une cassure double-brin à ce locus grâce aux propriétés endonucléases de la méganucléase I-SceI de levure. Nous avons créé une lignée de cellule ES qui portent un site unique de reconnaissance de la méganucléase I-SceI inséré dans l'intron 1 du gène Dct. Notre hypothèse était que l'induction d'une cassure double-brin au locus Dct serait recombinogène, et qu'en présence d'une matrice de réparation, la fréquence des recombinaisons homologues à ce locus serait augmentée de façon significative. Nous avons testé cette hypothèse et intégré successivement les gènes rapporteurs Lago1 et H2B-mCherry au locus Dct. Nos résultats indiquent que, de façon surprenante, l'induction d'une cassure double-brin ne favorise pas la recombinaison homologue au locus Dct. Nous avons analysé l'expression des gènes rapporteurs Lago1 et H2B-mCherry insérés au locus Dct dans des cellules en culture, l'embryon ou chez l'adulte |
| Original Identifier: | oai:tel.archives-ouvertes.fr:tel-00824944 |
| نوع الوثيقة: | Thesis |
| اللغة: | French |
| الإتاحة: | http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00824944Test http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/82/49/44/PDF/theseMF.pdfTest |
| رقم الانضمام: | edsndl.CCSD.oai.tel.archives.ouvertes.fr.tel.00824944 |
| قاعدة البيانات: | Networked Digital Library of Theses & Dissertations |
| الوصف غير متاح. |