Assessing Tn5 and Sleeping Beauty for transpositional transgenesis by cytoplasmic injection into bovine and ovine zygotes
| العنوان: | Assessing Tn5 and Sleeping Beauty for transpositional transgenesis by cytoplasmic injection into bovine and ovine zygotes |
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| المؤلفون: | Oscar Taboga, Daniel Felipe Salamone, Esther Grueso, S. Ferraris, O. Briski, Wilfried A. Kues, R. Fernandez-Martin, M. I. Hiriart, Zoltán Ivics, V. Savy, A. Gibbons, F. Lange, N. G. Canel, G. Vans Landschoot, R. J. Bevacqua, D. Texeira |
| المصدر: | PLoS ONE, Vol 12, Iss 3, p e0174025 (2017) PLoS ONE 12 (3) : e0174025 INTA Digital (INTA) Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria instacron:INTA PLoS ONE CONICET Digital (CONICET) Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas instacron:CONICET |
| بيانات النشر: | Public Library of Science (PLoS), 2017. |
| سنة النشر: | 2017 |
| مصطلحات موضوعية: | 0301 basic medicine, Cytoplasm, Embryology, Injection, Otras Biotecnología Agropecuaria, Transferencia de Genes, Swine, Zygote, Gene Transfer, Transposases, lcsh:Medicine, Artificial Gene Amplification and Extension, Polymerase Chain Reaction, SLEEPING BEAUTY, TRANSPOSITIONAL TRANSGENESIS, Zygotes, Electrophoretic Blotting, Ovinos, Inyección, Animals, Genetically Modified, 0302 clinical medicine, Plasmid, Animal Cells, Mobile Genetic Elements, lcsh:Science, Transposase, Gel Electrophoresis, Mammals, Multidisciplinary, Genetically Modified Organisms, purl.org/becyt/ford/4.4 [https], Genomics, Ruminants, Brucelosis, Genetically modified organism, Transgenesis, OVA, Vertebrates, Cellular Types, Genetic Engineering, Research Article, Biotechnology, Transposable element, Transgene, Biotecnología Agropecuaria, Molecular Probe Techniques, Biology, Research and Analysis Methods, Bovinae, 03 medical and health sciences, Electrophoretic Techniques, Genetic Elements, Tn5, Genetics, Animals, Molecular Biology Techniques, Molecular Biology, Reporter gene, Cigotos, Sheep, Genetically Modified Animals, Embryos, lcsh:R, Transposable Elements, Organisms, Biology and Life Sciences, Cell Biology, Sleeping Beauty transposon system, Molecular biology, 030104 developmental biology, Germ Cells, CIENCIAS AGRÍCOLAS, Amniotes, bacteria, Cattle, Blastocysts, lcsh:Q, Southern Blot, purl.org/becyt/ford/4 [https], 030217 neurology & neurosurgery, Developmental Biology |
| الوصف: | Transgenic domestic animals represent an alternative to bioreactors for large-scale production of biopharmaceuticals and could also provide more accurate biomedical models than rodents. However, their generation remains inefficient. Recently, DNA transposons allowed improved transgenesis efficiencies in mice and pigs. In this work, Tn5 and Sleeping Beauty (SB) transposon systems were evaluated for transgenesis by simple cytoplasmic injection in livestock zygotes. In the case of Tn5, the transposome complex of transposon nucleic acid and Tn5 protein was injected. In the case of SB, the supercoiled plasmids encoding a transposon and the SB transposase were co-injected. In vitro produced bovine zygotes were used to establish the cytoplasmic injection conditions. The in vitro cultured blastocysts were evaluated for reporter gene expression and genotyped. Subsequently, both transposon systems were injected in seasonally available ovine zygotes, employing transposons carrying the recombinant human factor IX driven by the beta-lactoglobulin promoter. The Tn5 approach did not result in transgenic lambs. In contrast, the Sleeping Beauty injection resulted in 2 lambs (29%) carrying the transgene. Both animals exhibited cellular mosaicism of the transgene. The extraembryonic tissues (placenta or umbilical cord) of three additional animals were also transgenic. These results show that transpositional transgenesis by cytoplasmic injection of SB transposon components can be applied for the production of transgenic lambs of pharmaceutical interest. Fil: Bevacqua, Romina Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina Fil: Fernández y Martín, Rafael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina Fil: Canel, Natalia Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina Fil: Gibbons, A.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Patagonia Norte. Estación Experimental Agropecuaria San Carlos de Bariloche; Argentina Fil: Texeira, D.. Universidade Estadual Do Ceara; Brasil Fil: Lange, F.. Universidad Maimónides; Argentina Fil: Vans Landschoot, Geraldina. Universidad Maimónides; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina Fil: Savy, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina Fil: Briski, Olinda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina Fil: Hiriart MI. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina Fil: Grueso, E.. Paul Ehrlich Institute; Alemania Fil: Ivics, Z.. Paul Ehrlich Institute; Alemania Fil: Taboga, Oscar Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Kues, W. A.. Friedrich Loeffler Institut; Alemania Fil: Ferraris, S.. Universidad Maimónides; Argentina Fil: Salamone, Daniel Felipe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina |
| وصف الملف: | application/pdf |
| اللغة: | English |
| تدمد: | 1932-6203 |
| الوصول الحر: | https://explore.openaire.eu/search/publication?articleId=doi_dedup___::6a2c7b3ed9d3a6275712d4617e98d663Test http://europepmc.org/articles/PMC5354444?pdf=renderTest |
| حقوق: | OPEN |
| رقم الانضمام: | edsair.doi.dedup.....6a2c7b3ed9d3a6275712d4617e98d663 |
| قاعدة البيانات: | OpenAIRE |
| تدمد: | 19326203 |
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