رسالة جامعية
Zymogenaktivierung in humanpathogenen Pilzen ; Charakterisierung des Substratspektrums regulatorischer Kex2-ähnlicher Proteasen ; Zymogen activation in human pathogenic fungi ; Characterization of the substrate spectrum of regulatory Kex2-like proteinases
| العنوان: | Zymogenaktivierung in humanpathogenen Pilzen ; Charakterisierung des Substratspektrums regulatorischer Kex2-ähnlicher Proteasen ; Zymogen activation in human pathogenic fungi ; Characterization of the substrate spectrum of regulatory Kex2-like proteinases |
|---|---|
| المؤلفون: | Bader, Oliver |
| المساهمون: | n, Prof. Dr. Bernhard Hube, Prof. Dr. Rupert Mutzel |
| سنة النشر: | 2008 |
| المجموعة: | FU Berlin: Refubium |
| مصطلحات موضوعية: | Candida albicans, Candida glabrata, Kex2, prohormone processing, subcellular localization, ddc:579, ddc:570 |
| الوصف: | Die Protease Kex2 ist eine im Trans-Golgi-Netzwerk von Pilzen lokalisierte Subtilisin-ähnliche Endoprotease. Sie prozessiert im Transit befindliche Proteine an spezifischen Lysin-Arginin-Motive („KR“) schneidet und aktiviert jene auf diese Weise. Die biochemische Aktivität des Modellenzyms Kex2 aus Saccharomyces cerevisiae ist in der Literatur gut charakterisiert, dennoch sind über die beiden klassischen Substrate Killertoxin und α-Kreuzungspheromon hinaus nur wenige weitere bekannt. KEX2-Deletionsmutanten besitzen ein sehr pleiotropes Spektrum an Phänotypen, die auf eine allgemeine Schwächung der Zellwand- und Plasmamembranintegrität hinweisen. Bei den beiden humanpathogenen Pilzen Candida albicans und C. glabrata führt dies zu einer reduzierten Virulenz. Die Phänotypen der Mutanten lassen sich jedoch nicht durch einen fehlende Aktivierung der wenigen bekannten Substrate von Kex2 erklären. Ziel dieser Arbeit war es daher, die Prozessierung vermuteter Substraten zu verifizieren und neue Kex2-Substrate bei den humanpathogenen Hefen C. albicans und C. glabrata zu identifizieren, um so das breite Spektrum an Phänotypen von Kex2-defizienten Mutanten besser erklären zu können. Die in einem einzelnen Pilzgenom kodierten Proteine enthalten ca. 20.000 bis 25.000 Motive, die Kex2-Schnittstellen ähneln. Das Protein Kex2 ist in der Zelle allerdings in einem späten Kompartiment des Trans-Golgi-Netzwerks lokalisiert. Mit Hilfe eines in dieser Arbeit entwickelten Algorithmus zur subzellulären Lokalisationsvorhersage konnte die Anzahl an potentiellen Schnittstellen auf 214 Motive bei C. albicans und 163 in bei C. glabrata reduziert werden. Zur funktionellen Überprüfung der Schnittstellen in diesen Proteinen wurden zunächst sowohl die Kex2-Proteasen aus C. albicans und C. glabrata als auch zur Kontrolle die Kex2-Proteasen aus S. cerevisiae und der biotechnologisch relevanten Hefe Pichia pastoris rekombinant exprimiert und aufgereinigt. Im zweiten Schritt wurden dann 23 ebenfalls rekombinante potentielle Substratproteine durch ... |
| نوع الوثيقة: | doctoral or postdoctoral thesis |
| وصف الملف: | application/pdf |
| اللغة: | German |
| تدمد: | 00000000 |
| العلاقة: | https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/3544Test; http://dx.doi.org/10.17169/refubium-7744Test; urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000004332-2 |
| DOI: | 10.17169/refubium-7744 |
| الإتاحة: | https://doi.org/10.17169/refubium-7744Test https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/3544Test https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000004332-2Test |
| حقوق: | http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/NutzungsbedingungenTest |
| رقم الانضمام: | edsbas.85045C07 |
| قاعدة البيانات: | BASE |
| تدمد: | 00000000 |
|---|---|
| DOI: | 10.17169/refubium-7744 |