المؤلفون: Sampedro Viana, Daniel

مرشدي الرسالة: Fernández Teruel, Albert

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Esquizofrènia, Model animal, Símptomes negatius, Esquizofrenia, Modelo animal, Síntomas negativos, Sczhiophrenia, Animal model, Negative symptoms, Ciències de la Salut

الوقت: 616.89

الوصف: La present Dissertació Doctoral concentra una sèrie d’estudis que afegeixen noves evidències conductuals, farmacològiques i neuroanatòmiques (d’activitat cel·lular) en suport de la validesa d’un model animal de trets rellevants per a l’esquizofrènia, la soca de rates ‘Romanes de alta evitació’ (RHA; comparades amb les ‘Romanes de baixa evitació’, o RLA). Al llarg de les darreres dècades, el nostre grup d’investigació s’ha centrat en aspectes del model relacionats amb la simptomatologia positiva i cognitiva de l’esquizofrènia, sense aprofundir en aspectes de la simptomatologia negativa. La recerca que aquí es presenta va destinada a investigar per primera vegada aspectes relacionats amb la simptomatologia negativa de la malaltia, com l’associalitat o manca d’interès per la conducta social. L’aspecte conductual simptomatològic comú entre els diferents estudis aquí presentats és l’associalitat, o retraïment social, un dels símptomes negatius més importants de l’esquizofrènia. Per tant, models animals capaços de modular diferents aspectes del desinterès per la interacció social poden ser valuosos per ampliar el coneixement sobre les característiques neurobiològiques subjacents a aquest aspecte de la simptomatologia negativa de l’esquizofrènia. En els primers estudis (Estudis 1-3), hem observat diferències entre les soques de rates Romanes (RHA vs. RLA) en relació amb la conducta social. Hem observat que la soca de rates RHA presenta una menor preferència social que la soca de rates RLA (Estudi 1), i que les femelles adultes de la soca RHA mostren una major preferència social que els mascles de la mateixa soca. A més a més, els resultats revelen una reducció en la preferència social dels animals adults en comparació amb els animals joves (Estudi 3). D’altre banda, hem estudiat els efectes del tractament ambiental d’estimulació neonatal (NH, de l’anglès ‘neonatal handling’) sobre la conducta social i sobre l’expressió de c-Fos (com a mesura d’activitat cel·lular) en diferents àrees cerebrals en ambdues soques (Estudi 1-2). El tractament NH ha estat capaç d’augmentar la interacció social en ambdues soques amb un efecte més marcat en la soca RHA, així com d’augmentar de forma específica l’expressió de c-Fos en zones de l’escorça prefrontal i subregions de l’amígdala de les rates RHA (Estudi 2). Per últim, i continuant amb la validació del model, en els estudis següents (Estudi 4-5) es va abordar l’objectiu general de la Dissertació Doctoral des d’una perspectiva farmacològica. Així, l’administració d’un antagonista del receptor glutamatèrgic NMDA, el MK801, vam veure que produeix un major dèficit de la conducta social i una major hiperactivitat en rates RHA que en les rates RLA (ambdós efectes considerats com a models d’aspectes relacionats amb l’esquizofrènia). D’altra banda, vam observar que l’administració de varis antipsicòtics atenua els efectes del MK801 sobre la preferència social i l’activitat locomotora, en major mesura en la soca RHA que en la soca RLA, essent l’antipsicòtic aripiprazol el que presenta major activitat ‘terapèutica’ (Estudi 4). De forma similar, l’administració concomitant de MK801 i oxitocina, un neuropèptid amb propietats antipsicòtiques naturals, va produir una atenuació dels efectes negatius del MK801 sobre la conducta social i la hiperactivat. Aquest efecte va resultar aparentment més marcat en la soca RHA que en la soca RLA (Estudi 5). Les dades que es mostren en aquesta Dissertació Doctoral afegeixen validesa aparent, de constructe i predictiva al model animal proposat, les rates RHA, com un recurs útil per la investigació i millor comprensió d’aspectes neurobiològics i conductuals rellevants per l’esquizofrènia.

الوصف (مترجم): La presente Disertación Doctoral concentra una serie de estudios que añaden nuevas evidencias conductuales, farmacológicas y neuroanatómicas (de actividad celular cerebral) en apoyo de la validez de un modelo animal de rasgos relevantes para la esquizofrenia, la cepa de ratas ‘Roman de alta evitación’ (RHA; comparadas con las ‘Roman de baja evitación’, o RLA). A lo largo de las últimas décadas nuestro grupo de investigación se ha centrado en aspectos del modelo relacionados con la sintomatología positiva y cognitiva de la esquizofrenia, sin profundizar en aspectos de la sintomatología negativa. Los estudios que aquí se presentan van destinados a investigar por primera vez aspectos relacionados con la sintomatología negativa de la esquizofrenia, como la asociabilidad o falta de interés por la conducta social. El aspecto conductual sintomatológico común entre los distintos estudios aquí presentados es la asociabilidad. En la esquizofrenia, la asociabilidad o retraimiento social, es uno de los síntomas negativos más importantes, y puede entenderse como una reducción en la motivación para crear nuevas relaciones con los demás. Por lo tanto, modelos animales capaces de modular diferentes aspectos del desinterés por la interacción social pueden ser valiosos para ampliar el conocimiento sobre las características neurobiológicas subyacentes a este aspecto de la sintomatología negativa de la esquizofrenia. En los primeros estudios (Estudios 1-3) hemos observado diferencias entre las cepas de ratas Roman (RHA vs. RLA) en relación con la conducta social. Hemos observado que la cepa de ratas RHA presenta una menor preferencia social que la cepa de ratas RLA (Estudio 1). Además, los resultados revelan una reducción en preferencia social de los animales adultos en comparación con los animales jóvenes, así como que las hembras adultas de la cepa RHA muestran una mayor preferencia social que los machos de la misma cepa (Estudio 3). Del mismo modo, hemos estudiado los efectos del tratamiento ambiental de estimulación neonatal (NH, del inglés ‘neonatal handling’) sobre la conducta social y sobre la expresión de c-Fos (como medida de activación celular) en varias áreas cerebrales en ambas cepas (Estudio 2). El tratamiento de NH ha sido capaz de aumentar la interacción social en ambas cepas con un efecto más marcado en las ratas RHA, así como de aumentar de forma específica la expresión de c-Fos en zonas de la corteza prefrontal y subregiones de la amígdala de las ratas RHA (Estudio 2). Por último, y continuando con la validación del modelo, en los estudios siguientes (Estudio 4-5) se abordó el objetivo general de la Disertación Doctoral desde una perspectiva farmacológica. Así, la administración de un antagonista del receptor glutamatérgico NMDA, el MK801, produce un mayor déficit de conducta social y una mayor hiperactividad (ambos efectos considerados como modelos de aspectos relacionados con la esquizofrenia) en las ratas RHA que en las ratas RLA. Así mismo, la administración de varios antipsicóticos atípicos atenúa los efectos del MK801 sobre la preferencia social y la actividad locomotora en mayor medida en la cepa RHA que en la cepa RLA, siendo el antipsicótico aripiprazol el que presenta mayor actividad ‘terapéutica’ (Estudio 4). De modo similar, la administración concomitante de MK801 y oxitocina, un neuropéptido con propiedades antipsicóticas naturales, produjo una atenuación de los efectos negativos del MK801 sobre la conducta social y la hiperactividad. Dicho efecto resultó aparentemente más marcado en la cepa RHA que en la cepa RLA (Estudio 5). Los datos que se muestran en esta Disertación Doctoral añaden validez aparente, de constructo y predictiva al modelo animal propuesto, las ratas RHA, como un recurso útil para la investigación y mejor comprensión de aspectos neurobiológicos y conductuales relevantes para la esquizofrenia.
This Doctoral Dissertation focuses on a series of studies that add new behavioural, pharmacological, and neuroanatomical evidence (of cell activity) in support of the validity of an animal model of schizophrenia-relevant traits, the ‘Roman High Avoidance’ strain of rats (RHA; compared to ‘Roman Low Avoidance’, or RLA). Along the last decades, our research group has focused on aspects of the model related to the positive and cognitive symptomatology of schizophrenia, without delving into aspects of negative symptomatology. The studies presented here intended to investigate, for the first time, aspects related to the negative symptomatology of schizophrenia, such as asociality or lack of interest in social behaviour. The common symptomatologic behavioural aspect among the different studies presented here is asociality. In schizophrenia, asociality or social withdrawal is one of the most important negative symptoms and it can be understood as a reduction in the motivation to create new relationships with others. Therefore, animal models recapitulating different aspects of lack of motivation for social interaction may be valuable to expand our knowledge about the neurobiological characteristics underlying this aspect of the negative symptomatology of schizophrenia. In the first studies (Studies 1-3) we observed differences between the Roman rat strains (RHA vs. RLA) in relation to social behaviour. We have observed that the RHA rat strain exhibits lower social preference than the RLA rat strain (Study 1). In addition, the results reveal a reduction in social preference of adult animals compared to young animals, as well as that adult females of the RHA strain show a greater social preference than males of the same strain (Study 3). Furthermore, we have studied the effects of neonatal handling (NH; a neonatal environmental stimulation treatment) on social behaviour and c-Fos expression (as a measure of neuronal activation) in various brain areas in both rat strains (Study 1-2). NH treatment was able to increase the social preference of both strains with a more marked effect in RHA rats, and the treatment specifically increased the expression of c-Fos in areas of the prefrontal cortex and subregions of the amygdala of RHA rats (Study 2). Finally, in the following studies (Study 4-5) the general objective of the Doctoral Dissertation was addressed from a pharmacological perspective. Thus, the administration of a glutamatergic NMDA receptor antagonist, MK801, produces greater deficits in social behaviour and greater hyperactivity (both effects are considered to model aspects related to schizophrenia) in RHA rats than RLA rats. Likewise, the administration of various atypical antipsychotics attenuates the effects of MK801 on social preference and locomotor activity to a greater extent in the RHA strain than in RLA rats, with the antipsychotic aripiprazole showing the greatest “therapeutic” activity (Study 4). Similarly, concomitant administration of MK801 and oxytocin, a neuropeptide with natural antipsychotic properties, resulted in attenuation of the negative effects of MK801 on social behaviour and hyperactivity. This effect was apparently more marked in the RHA strain than in RLA rats (Study 5). The data reported in this Doctoral Dissertation add face, construct, and predictive validity to the proposed animal model, the RHA rats, as a useful tool for research and for a better understanding of neurobiological and behavioural aspects relevant to schizophrenia.
Universitat Autònoma de Barcelona. Programa de Doctorat en Neurociències

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/690538Test

المؤلفون: Margalef Perez, Joan Ramon

المساهمون: University/Department: Universitat Rovira i Virgili. Departament de Ciències Mèdiques Bàsiques

مرشدي الرسالة: Santafé Martínez, Manuel

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Punt Gallet Miofascial, Corrent galvanica, Model animal, Punto Gatillo Miofascial, Corriente galvanica, Modelo animal, Myofascial trigger point, Galvanic Current, Animal model, Ciències de la Salut

الوقت: 616.7, 616.8

الوصف: El punt gallet miofascial (PGM) es un dels responsables de generar dolor en pacients. Segons la hipòtesi integrada, unneurotransmissió espontània elevada en una o diverses unions neuromusculars (UNMS) pot estar relacionada. En aquesta tesi, mitjançant fàrmacs inhibidors de l'acetilcolinesterasa s'ha generat un augment d'acetilcolina (ACh) en la fenedura sinàptica de les UNMS dels músculs de ratolins suïssos i rates Sprague Dawley. Mitjançant registres intracel·lulars i registres electromiogràfics es va observar un gran increment de la neurotransmissió espontània. Aquests canvis estan associats amb la disminució de l'àrea dels receptors d'ACh, la presència de nòduls contracturats proper a les UNMS i un augment de glicosaminoglicans. A mes, es van identificat mitjançant l'ecografia respostes d'espasme local (REL), després d'estimular els PGM amb una agulla. Amb aquest model animal de PGM es van aplicar corrents galvàniques (CG) intramusculars a través d'agulles. Les CGamb els protocols 1.5mA durant 5 segons i 3 aplicacions, i 3 mA durant 3 segons i 3 aplicacions van ser els més efectius per revertir els registres electrofisiològics. Finalment, la CG va generar un major nombre de RELs i de major velocitat. Està descrit que l'administració de la CG a través d'agulles sòlides en els teixits biològics pot generar un augment de la temperatura, un deteriorament de la morfologia i compostos de les agulles. Per a això, es van avaluar 3 mA durant 3 segons i 3 aplicacions de agulles Physio Invasiva® i AguPunt® en tubs plens de solució Ringer i altres insertades a músculs. Els resultats no van mostrar canvis de temperatura ni de pH meva resistència ni tampoc en la composició i morfologia. No obstant això si poden causar deteriorament de la morfologia i composició dels materials, si s'augmenta el nombre d'aplicacions.

الوصف (مترجم): El punto gatillo miofascial (PGM) es uno de los responsables de generar dolor en pacientes. Según la hipótesis integrada, una neurotransmisión espontánea elevada en una o varias uniones neuromusculares (UNMS) puede estar relacionada. En esta tesis, mediante fármacos inhibidores de la acetilcolinesterasa se ha generado un aumento de acetilcolina (ACh) en la hendidura sináptica de las UNMS en músculos de ratones suizos y ratas Sprague Dawley. Mediante registros intracelulares y registros electromiográficos se observó un gran incremento de la neurotransmisión espontánea. Estos cambios están asociados con la disminución del área de los receptores de ACh, la presencia de nódulos contracturados próximos a las UNMS y un aumento de glicosaminoglicanos. Además, se identificado mediante la ecografía respuestas de espasmo local (REL), después de estimular los PGM con una aguja. Con este modelo animal de PGM se aplicaron corrientes galvánicas (CG) intramusculares a través de agujas. Las CG con los protocolos 1.5m durante 5 segundos y 3 aplicaciones, y 3 mA durante 3 segundos y 3 aplicaciones fueron los más efectivos para revertir los registros electrofisiológicos. Finalmente, la CG generó un mayor número de raíces y de mayor velocidad. Está descrito que la administración de la CG a través de agujas sólidas en los tejidos biológicos puede generar un aumento de la temperatura, un deterioro de la morfología y compuestos de las agujas. Por ello, se evaluaron 3 mA durante 3 segundos y 3 aplicaciones de agujas Physio Invasiva® y AguPunt® en tubos llenos de solución Ringer y otras insertadas en músculos. Los resultados no mostraron cambios de temperatura ni de pH mi resistencia ni tampoco en la composición y morfología. Sin embargo, si pueden causar deterioro de la morfología y composición de los materiales, si se aumenta el número de aplicaciones.
The myofascial trigger point (MTrPs) is one of those responsible for generating pain in patients. According to the integrated hypothesis, an elevated spontaneous neurotransmission in one or more neuromuscular junctions (NMJ) may be involved. In this thesis, acetylcholinesterase inhibitor drugs have generated an increase in acetylcholine (ACh) in the synaptic cleft of the NMJin muscles of Swiss mice and Sprague Dawley rats. Through intracellular recordings and electromyographic recordings, a large increase in spontaneous neurotransmission was observed. These changes are associated with a decrease in the area of ACh receptors, the presence of contracted nodes near the NMJ and an increase in glycosaminoglycans. In addition, local twitch responses (LTR) were identified by ultrasound after stimulating the MTrPs with a needle. With this animal model of MTrPs, galvanic currents (GC) were applied intramuscularly through needles. GC with the protocols 1.5m for 5 seconds and 3 applications, and 3 mA for 3 seconds and 3 applications were the most effective in reversing the electrophysiological recordings. Finally, the CG generated a greater number of LTR and each of greater speed. It has been described that the administration of GC through solid needles in biological tissues can generate an increase in temperature, a deterioration of the morphology and compounds of the needles. Therefore, 3 mA for 3 seconds and 3 applications of Physio Invasiva® and AguPunt® needles were evaluated in tubes filled with Ringer's solution and others inserted into muscles. The results did not show changes in temperature or pH, my resistance, nor in composition and morphology. However, if they can cause deterioration of the morphology and composition of the materials, if the number of applications is increased.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/672794Test

المؤلفون: Bosque Alberich, Marc

المساهمون: University/Department: Universitat Rovira i Virgili. Departament de Ciències Mèdiques Bàsiques

مرشدي الرسالة: Santafé Martínez, Manuel

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Estrès, Punt Gallet Miofascial, Model animal, Punto Gatillo Miofascial, Modelo animal, Stress, Myofascial Trigger point, Animal model, Ciències de la Salut

الوقت: 616.8

الوصف: Els punts gallet miofascials (PGM) estan causats per un conjunt de síntomes sensibles, motors i autonòmics, i constitueixen la síndrome de dolor muscular miofascial (SDM). Tot i que no hi ha evidencies, s’ha proposat al estrès com a generador i perpetuador del SDM. La teoria fisiopatològica mes acceptada proposa que els PGM involucren un increment de ACh en els músculs afectats. Objectiu: L’objectiu d’aquest estudi ha estat avaluar la relació entre els estrés i la generació de PGM. Mètodes: Es van analitzar 5 factors estressants aguts (immobilització, natació forçada, privació de menjar i aigua, aïllament social i ultrasons) a ratolins mascle de 4-6 setmanes d'edat. Posteriorment, aquests estressos van ser combinats per provar de generar un estres crònic. Per a l'estudi de l’alliberament de ACh es van avaluar els músculs dels animals abans i després de l'aplicació de l'estrès, mitjançant l'ús de dues tècniques: registre intracel·lular de neurotransmissió espontània (mEPPs) i registre electromiogràfic de soroll de placa. Per a l'estudi morfològic, tècnica PAS-Alcián es van realitzar amb la finalitat de veure PGM

الوصف (مترجم): normalitzats a la setmana. l'estrès nic, es va obtenir un increment més gran que es va mantenir durant 15 dies. No obstant això, la tècnica de cián no va PGM en cap dels períodes post-tractament estudiats. Conclusió: l’estrès, tant en la seva forma aguda com a nica, és insuficient per generar PGM actuant com a factor aïllat, encara que indueix alguns dels seus signes característics electrofisiològics i electromiogràfics, convertint-se en un element rellevant en la generació, perpetuació, agravament i / o nificació del SDM. Los puntos gatillo miofasciales (PGM) están causados por un conjunto de síntomas sensibles, motores y autonómicos, y constituyen el síndrome de dolor muscular miofascial (SDM). Aunque no hay evidencias, se ha propuesto el estrés como generador y perpetuador del SDM. La teoría fisiopatológica mes aceptada propone que los PGM involucran un incremento de ACh en los músculos afectados. Objetivo: El objetivo de este estudio ha sido evaluar la relación entre los estrés y la generación de PGM. Métodos: Se analizaron 5 factores estresantes agudos (inmovilización, natación forzada, privación de comida y agua, aislamiento social y ultrasonidos) a ratones macho de 4-6 semanas de edad. Posteriormente, estos estreses fueron combinados para probar de generar un estrés crónico. Para el estudio de la liberación de ACh se evaluaron los músculos de los animales antes y después de la aplicación del estrés, mediante el uso de dos técnicas: registro intracelular de neurotransmisión espontánea (Meppen) y registro electromiográfico de ruido de placa. Para el estudio morfológico, técnica PAS-Alcián se realizaron con el fin de ver PGM
siguientes y normalizados a la semana. Con el estrés nico, se obtuvo un incremento mayor que se mantuvo durante 15 días. Sin embargo, la técnica de cián no PGM en ninguno de los periodos post-tratamiento estudiados. Conclusión: el estrés, tanto en su forma aguda como nica, es insuficiente para generar PGM actuando como factor aislado, aunque induce algunos de sus signos característicos electrofisiológicos y electromiográficos, convirtiéndose en un elemento relevante en la generación, perpetuación, agravamiento y / o nificación del SDM. Myofascial trigger points (PGM) are caused by a set of sensitive, motor, and autonomic symptoms, and constitute myofascial muscle pain syndrome (SDM). Although there is no evidence, stress has been proposed as a generator and perpetuator of SDM. The most accepted pathophysiological theory proposes that PGMs involve an increase in ACh in the affected muscles. Objective: The aim of this study was to evaluate the relationship between stress and the generation of PGM. Methods: 5 acute stressors (immobilization, forced swimming, food and water deprivation, social isolation, and ultrasound) were analyzed in 4–6-week-old male mice. Subsequently, these stresses were combined to try to generate chronic stress. For the study of ACh release, the muscles of the animals were evaluated before and after the application of stress, using two techniques: spontaneous neurotransmission intracellular recordings (mEPPs) and endplate noise electromyographic recordings. For morphological study, PAS-Alcián technique were performed in order to see PGM.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/672473Test

المؤلفون: Gutiérrez Galiacho, Aida

مرشدي الرسالة: Armentano i Oller, Núria, Malgosa Morera, Assumpció, Nociarová, Dominika

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Tafonomia, Taphonomy, Antropologia de camp, Antropología de campo, Field anthropology, Model animal, Modelo animal, Animal model, Ciències Experimentals

الوصف: La Tafonomia permet entendre els processos que pateixen els cossos post mortem. L’objectiu de la present Tesi Doctoral és relacionar els efectes tafonòmics observats en diferents enterraments amb els possibles agents i processos tafonòmics que els van causar. Per a això, es van crear les instal·lacions Taphos-m amb 26 estructures funeràries de diferents característiques constructives (espai buit vs. espai colmatat) i reproduint enterraments amb calç i embalatge de tela. En elles van ser enterrats exemplars de Sus scrofa domestica de característiques biològiques conegudes. Es va realitzar un seguiment continuat de les instal·lacions i entre 3 i 6 anys després de l’inici del projecte es van analitzar els enterraments. El pas del temps va modificar de manera considerable l’estat de les instal·lacions: la vegetació va créixer de forma abundant cobrint completament les estructures funeràries; es van produir depressions del terreny de les fosses simples que es van mantenir en el temps; i el despreniment del turó pròxim a les instal·lacions va cobrir de sediment i danyar algunes estructures funeràries provocant la pèrdua de la hermeticitat de totes elles. A cada intervenció es va valorar l’estat cadavèric de les carcasses, la distribució espacial òssia, les modificacions en la superfície cortical dels ossos i la fragmentació òssia, i es van intentar relacionar amb els possibles agents i processos responsables, entre ells, la fauna cadavèrica i els fongs associats als enterraments. La tipologia de l’estructura funerària va determinar l’estat cadavèric de les carcasses i va donar lloc a diferents patrons de distribució espacial òssia, des de articulat estricte a desplaçat. Els canvis en la superfície cortical dels ossos (canvis de coloració, taques, perforacions, exfoliació, etc.) i la fragmentació òssia van ser ocasionades per diferents agents i processos tafonòmics, majoritàriament de naturalesa biològica. A més, es van identificar diferents grups d’insectes en els enterraments de Taphos-m: necròfags, necròfils, omnívors i espècies oportunistes que van colonitzar les carcasses pre- i post-deposició dels porcs en les estructures funeràries. La manca d’un protocol de treball estandarditzat per al mostreig i estudi de les colònies fúngiques associades als enterraments va suposar el disseny de diferents estratègies de treball per Taphos-m. El mostreig amb plaques de contacte RODAC amb un mitjà de cultiu amb antibiòtic va garantir el creixement i posterior estudi de les colònies al laboratori. Tot i que la majoria de colònies identificades ja havien estat relacionades amb cossos en descomposició, 14 gèneres no s’havien vinculat mai a aquest tipus de substrat. En conclusió, en les estructures d’espai buit es van conservar més els teixits tous i la tela de cotó, les carcasses es van desarticular, els ossos van presentar una coloració més fosca i amb taques pels líquids de la descomposició, hi va haver major accés de la fauna cadavèrica colonitzadora post-deposició i en els enterraments amb calç es va observar la crosta de calç envoltant la carcassa. En canvi, en les estructures colmatadas, les carcasses estaven esqueletizadas i, en general, van mantenir la distribució espacial òssia, la coloració dels ossos va ser més clara pel contacte prolongat i directe amb el sediment, l’accés de la fauna cadavèrica va estar limitat i només es van observar petits residus de calç.

الوصف (مترجم): La Tafonomía permite entender los procesos que sufren los cuerpos post mortem. El objetivo de la presente Tesis Doctoral es relacionar los efectos tafonómicos observados en diferentes enterramientos con los posibles agentes y procesos tafonómicos que los causaron. Para ello, se crearon las instalaciones Taphos-m con 26 estructuras funerarias de distintas características constructivas (espacio vacío vs. espacio colmatado) y reproduciendo enterramientos con cal y envoltura de tela. En ellas fueron enterrados ejemplares de Sus scrofa domestica de características biológicas conocidas. Se realizó un seguimiento continuado de las instalaciones y entre 3 y 6 años después del inicio del proyecto se analizaron todos los enterramientos. El paso del tiempo modificó de manera considerable el estado de las instalaciones: la vegetación creció de forma abundante cubriendo por completo las estructuras funerarias; se produjeron depresiones del terreno de las fosas simples que se mantuvieron en el tiempo; y el desprendimiento del montículo próximo a las instalaciones colmató de sedimento y dañó algunas estructuras funerarias provocando la pérdida de la hermeticidad de todas ellas. En cada intervención se valoró el estado cadavérico de las carcasas, la distribución espacial ósea, las modificaciones en la superficie cortical de los huesos y la fragmentación ósea, y se intentaron relacionar con los posibles responsables, entre ellos, la fauna cadavérica y los hongos asociados a los enterramientos. La tipología de la estructura funeraria determinó el estado cadavérico de las carcasas y dio lugar a distintos patrones de distribución espacial ósea, desde articulado estricto a desplazado. Los cambios en la superficie cortical de los huesos (cambios de coloración, manchas, perforaciones, exfoliación, etc.) y la fragmentación ósea fueron ocasionadas por distintos agentes y procesos tafonómicos, en su mayoría de naturaleza biológica. Además, se identificaron diferentes grupos de insectos en los enterramientos de Taphos-m: necrófagos, necrófilos, omnívoros y especies oportunistas que colonizaron las carcasas pre- y post-deposición de los cerdos en las estructuras funerarias. La falta de un protocolo de trabajo estandarizado para el muestreo y estudio de las colonias fúngicas asociadas a los enterramientos supuso el diseño de distintas estrategias de trabajo para Taphos-m. El muestreo con placas de contacto RODAC con un medio de cultivo con antibiótico garantizó el crecimiento y posterior estudio de las colonias en el laboratorio. Aunque la mayoría de colonias identificadas ya habían sido relacionadas con cuerpos en descomposición, 14 géneros no se habían vinculado nunca a este tipo de substrato. En conclusión, en las estructuras de espacio vacío se conservaron más los tejidos blandos y la tela de algodón, las carcasas se desarticularon, los huesos presentaron una coloración más oscura y con manchas por los líquidos de la descomposición, hubo mayor acceso de la fauna cadavérica colonizadora post-deposición y en los enterramientos con cal se observó la costra de cal rodeando la carcasa. En cambio, en las estructuras colmatadas, las carcasas estaban esqueletizadas y, en general, mantuvieron la distribución espacial ósea, la coloración de los huesos fue más clara por el contacto prolongado con el sedimento, el acceso de la fauna cadavérica estuvo limitado y solo se observaron pequeños residuos de cal.
Taphonomy helps to understand the issues related to changes of the cadaveric remains. The aim of this PhD is to relate the taphonomic effects observed in different type of burials with its probable causative agents and taphonomic processes. Therefore, the Taphos-m experimental project was born. It consisted of 26 funerary structures with different burial types ("empty space" vs. simple fosses), reproducing burials with lime and cotton cloth. In these facilities, 26 samples of Sus scrofa domestica were buried, whose ante mortem information was known. The Taphos-m facilities were monitored and 3-6 years after the burials, all the funerary structures were opened. There were several changes in the facilities produced by the growth of vegetation, the presence of depression of the grave fill and the detachment of the mound near the facilities, causing the loss of the impenetrability of the burials. In every intervention, the cadaveric state of the carcasses, the articulation pattern, the modification in the cortical surface of the bones and the bone fragmentation were analysed, and it was tried to relate them with the possible cause, such as insects and fungi. The type of the funerary structure determined the cadaveric state of the carcasses and the different articulation patterns. Changes in the cortical surface of the bones (for example, discoloration, staining, perforation and exfoliation) and the bone fragmentation were caused by different taphonomic agents and processes, mostly biological. Different groups of insects were identified in the Taphos-m burials that colonized pig carcasses pre- and post-deposition. Protocols and different sampling strategies were designed for the study of fungi, due to the lack of standardized work methods. Sampling with RODAC contact plates with antibiotic culture medium was the best sampling strategy, since it guaranteed the growth of the colonies in the laboratory. Even though the most of the colonies identified in the Taphos-m burials had already been related to cadavers, it was the first time for 14 genera. In conclusion, in the "empty space" burials, the soft tissues and the cotton cloth were better conserved; the carcasses were disarticulated; the bones presented a darker coloration and stains appeared because of the decomposition liquids; there was greater access for the insects; and lime plates around the pig carcass were observed. Nevertheless, in the simple fosses, the carcasses were skeletonized and articulated; the coloration of the bones was clearer due to prolonged contact with the sediment; the access of the fauna was limited; and only small residues of lime were observed.
Universitat Autònoma de Barcelona. Programa de Doctorat en Biodiversitat

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/673327Test

المؤلفون: Castro González, Lidia

المساهمون: University/Department: Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Cirurgia

مرشدي الرسالة: Sahuquillo Barris, Juan

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Traumatisme cranioencefàlic, Traumatismo craneoencefálico, Traumatic brain injury, Infart cerebral maligne, Infarto cerebral maligno, Malignant cerebral infarct, Model animal porcí, Modelo animal porcino, Pig animal model, Ciències de la Salut

الوصف: El traumatismo craneoencefálico (TCE) tiene un gran impacto socio-económico y sanitario en todo el mundo, y es una de las principales causas de mortalidad y discapacidad entre la población adulta menor de 40 años. El infarto cerebral maligno, es un tipo de infarto cerebral isquémico, que tiene una mortalidad de alrededor del 80%, y su incidencia aumenta con la edad del paciente. Ambas patologías se caracterizan porque su evolución puede provocar graves desequilibrios iónicos a nivel de las neuronas y de las células gliales, con el consecuente arrastre osmótico de agua y la formación de edema citotóxico. El edema puede evolucionar provocando un efecto de masa que causa la compresión, deformación y herniación de las estructuras cerebrales, pudiendo provocar la muerte del paciente, debido entre otras cosas al aumento de la presión intracraneal (PIC). Los TCEs y los infartos malignos se abordan siguiendo las mismas estrategias de tratamiento, que pasan por el seguimiento de la evolución de la lesión, la monitorización multimodal del paciente, y en último caso su intervención quirúrgica. Entender los procesos implicados en la patofisiología del TCE y del infarto, es esencial para su correcto tratamiento. Muchos de los estudios actuales, dirigen su atención a los mecanismos implicados en la formación del edema citotóxico inicial, y en concreto al estudio de un nuevo canal iónico involucrado en su progresión. Este canal está formado por una subunidad reguladora que recibe el nombre de receptor de sulfonilurea 1 (SUR1) y una subunidad formadora de poro, el receptor de potencial transitorio de la melastatina 4 (TRPM4). Juntos constituyen el canal SUR1-TRPM4, que ha demostrado estar sobre-expresado en pacientes y modelos animales de TCE e infarto cerebral, entre otras patologías. El bloqueo de este canal con fármacos como la glibenclamida (un inhibidor de sulfonilureas), ha demostrado mejorar el pronóstico neurológico en modelos animales de roedores y estudios clínicos con pacientes. La subunidad reguladora SUR1, además de asociarse con TRPM4, también regula la apertura de canales de potasio dependientes de adenosín trifosfato (ATP)(KATPs), entre los que se encuentra el canal iónico rectificador de entrada de potasio 6.2 (Kir6.2). El canal SUR1-Kir6.2 ha sido estudiado ampliamente en células del páncreas y cardiomiocitos, entre otros. Sin embargo, la expresión de este canal no ha sido estudiada en profundidad a nivel cerebral en humanos. Este canal acopla el metabolismo de la célula a la actividad eléctrica, mediante la regulación del flujo de K+ a través de la membrana celular. Se considera que tiene una función neuroprotectora, induciendo la hiperpolarización celular durante episodios de hipoxia y/o isquemia. Lo que esta tesis pretende es, en primer lugar, el desarrollo de un nuevo modelo animal de isquemia regional en cerdo común, que sea estable y reproducible. Este modelo permitirá una mejor comprensión de los procesos isquémicos que tienen lugar en pacientes que han sufrido un infarto cerebral maligno, para poder extrapolarlos en un segundo paso a las lesiones cerebrales traumáticas. El uso de modelos animales es esencial para conseguir una mejor comprensión de los mecanismos implicados en cualquier patología, así como para poder desarrollar nuevas estrategias protectoras contra esta. En segundo lugar, se pretende profundizar en el estudio de los canales regulados por SUR1, en concreto Kir6.2, el menos estudiado a nivel del SNC en humanos hasta la fecha. Para ello, se estudió su expresión en tejido pericontusional cerebral de humanos con la pretensión de conocer mejor su función en este tipo de patologías.

الوصف (مترجم): Traumatic brain injury (TBI) has a great socio-economic and sanitary impact in the whole world and is one of the leading causes of mortality and disability in adult population with less than 40 years. Malignant cerebral infarction is a type of ischemic cerebral infarct that has an elevated mortality of around 80%, and its incidence increases with the age of the patient. The evolution of both pathologies can lead to severe ionic disarrangements in neurons and glial cells, osmotic water displacement and cytotoxic edema formation. Edema can evolve causing a mass effect that leads to compression, deformation and herniation of the cerebral structures that can result in patient’s death, due to the increase of the intracranial pressure (ICP), among other causes. TBIs and malignant infarcts are treated following the same strategies, which are the monitoring of lesion evolution, multimodal monitoring of the patient and as a last resort, surgical intervention. Understanding the processes involved in the pathophysiology of the TBI and cerebral infarct, is essential for their correct treatment. Many of the current studies, focus their attention on the mechanisms involved in the formation of the initial cytotoxic edema and specially, in the study of a new ionic channel that is related to the progression of the edema. This channel is constituted by a regulator subunit named sulfonylurea receptor 1 (SUR1) and a pore forming subunit called transient receptor potential melastatin 4 (TRPM4). Both subunits together form the channel SUR1-TRPM4 that is overexpressed in patients and in animal models of TBI and cerebral infarct, among other pathologies. The blockage of this channel with drugs like glibenclamide (an inhibitor of sulfonylureas), has demonstrated to improve neurological outcome in rodent animal models and also in clinical assays with patients. Regulator subunit SUR1 is not only associated to TRPM4, but also regulates the opening of adenosine phosphate (ATP)-sensitive potassium channels (KATPs), which include the inwardly rectifier potassium ion channel 6.2 (Kir6.2). The channel SUR1-Kir6.2 has been well studied in pancreatic and cardiac cells, among others. However, the expression of this channel has not been deeply studied in the human brain. This channel couples cell metabolism to electric activity, regulating the K+ flux through the cell membrane. It is considered that it has a neuroprotective function, inducing the cell hyperpolarization during hypoxic and/or ischemic episodes. The aim of this doctoral thesis is, first of all, the development of a new animal model of regional ischemia in common pig, stable and reproducible. This model will allow a better understanding of the ischemic processes that occur in patients with a malignant cerebral infarction, to extrapolate it in second place to traumatic brain lesions. The use of animal models is essential to achieve a better understanding of the mechanisms involved in any pathology, and to develop new treatment strategies. The aim of the second part of this thesis was to study in detail the channels regulated by SUR1, and especially Kir6.2 channel, the less studied in human brain to the date. For this purpose, Kir6.2 expression was studied in human pericontusional brain tissue, with the aim to achieve a better understanding of its function in this kind of pathologies.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/668009Test

المؤلفون: Fernández Peñuela, Randolfo Javier

المساهمون: University/Department: Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Cirurgia

مرشدي الرسالة: Masià, Jaume, Casaní Arazo, Laura

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Model animal, Modelo animal, Animal model, Gangli linfàtic, Ganglio linfático, Lymph node, Limfedema, Linfedema, Lymphedema, Ciències de la Salut

الوصف: La primera publicación se realizó con el objetivo de encontrar un modelo animal viable para la práctica del desarrollo y tratamiento quirúrgico del linfedema. El modelo animal seleccionado fue el conejo, es fácil de manejar, tiene un tamaño adecuado y su sistema linfático está bien definido. En el artículo se describe como se crea el desarrollo del linfedema y su tratamiento mediante la realización de anastomosis linfático venosas. En el segundo artículo se utiliza el mismo modelo animal y se realiza la generación de linfedema en el miembro posterior del conejo mediante la eliminación del ganglio linfático poplíteo. Para el tratamiento del linfedema se realiza la transferencia del ganglio poplíteo contralateral.

الوصف (مترجم): The first publication aim was to find a viable animal model for the development of secondary lymphedema in order to study its surgical treatment. The animal model selected was the rabbit, because is easy to handle, adequate size and its lymphatic system is well defined. The article describes the induction of a lymphedema and its treatment by performing venous lymphatic anastomoses. In the second article the same animal model is used and the generation of lymphedema in the hind limb of the rabbit is carried out by lymph node exeresis. For the treatment of lymphedema, the contralateral popliteal node is transplanted.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/667761Test

المؤلفون: Sánchez González, Ana

المساهمون: University/Department: Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Psiquiatria i de Medicina Legal

مرشدي الرسالة: Fernández-Teruel, Albert

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Neurociència conductual, Neurociencia conductual, Behavioral neurosciences, Esquizofrènia, Esquizofrenia, Schizophrenia, Model animal, Animal model, Ciències de la Salut

الوقت: 616.89

الوصف: La presente Tesis Doctoral concentra una serie de estudios en los que hemos intentado reunir la mayor cantidad de evidencia posible a un nivel conductual, anatómico y neuroquímico con el objetivo de validar un nuevo modelo animal para el estudio de síntomas relevantes para la esquizofrenia. Este modelo está constituido por las ratas Romanas, dos cepas de ratas que han sido seleccionadas por su rápida (RHA-I) versus extremadamente pobre (RLA-I) adquisición de la tarea de evitación activa en dos sentidos en la “shuttle box”, dando como resultado dos cepas con perfiles marcadamente diferentes en sensibilidad al estrés, ansiedad/miedo, impulsividad, vulnerabilidad a drogas de abuso y fenotipos relacionados con los sistemas de neurotransmisión dopaminérica, serotoninérgica y glutamatérgica. En el presente trabajo hemos realizado una serie de experimentos destinados a completar la caracterización de las ratas Romanas en fenotipos comportamentales, neuroquímicos y neuroanatómicos, relacionados con la esquizofrenia. Hemos llevado a cabo estudios con dos paradigmas conductuales, como son la inhibición prepulso (IPP) y la inhibición latente (IL) (estudios 1 y 2), en los que hemos obtenido que las ratas RHA-I presentan una IPP e IL afectadas, indicando que estos fenotipos están relacionados de alguna manera y puede que compartan mecanismos subyacentes comunes. Del mismo modo, hemos testado los efectos de una manipulación ambiental crónica como la crianza de los animales en aislamiento (estudio 3), a nivel (i) conductual con una extensa batería de tests para fenotipos relevantes para la esquizofrenia, (ii) molecular, con el análisis de la densidad del receptor 5HT2A, y (iii) anatómico con la estimación del volumen de tres áreas relevantes para la esquizofrenia como el córtex prefrontal (PFC), el estriado dorsal (dSt) y el hipocampo (HPC). Hemos constatado que, mientras que el perfil conductual ha seguido nuestras expectativas iniciales de mayores déficits inducidos por el aislamiento social en las ratas RHA-I, hemos obtenido resultados controvertidos en los análisis de densidad de receptor y estimación de volumen. Así, aunque no se han observado diferencias en densidad de receptores 5HT2A, sí existen diferencias entre las cepas en volumen del PFC, HPC y dSt (RLA-I>RHA-I en todos los casos), y el aislamiento social induce un incremento global del volumen del PFC. Además, por la necesidad de transferir los animales desde las instalaciones en nuestro laboratorio, donde han sido mantenidas desde 1993, a una nueva instalación de tipo SPF (libre de patógenos específicos) en la Universidad Autónoma de Barcelona, llevamos a cabo un procedimiento de transferencia embrionaria (estudio 4) y testamos la quinta generación de animales de esta nueva colonia SPF en los fenotipos más comúnmente usados en la caracterización de las ratas Romanas. De estos análisis observamos que estas nuevas cepas Romanas SPF presentan en la G5 las diferencias típicas en todos los fenotipos estudiados, tanto conductuales como hormonales. Por último, dados los resultados del estudio 3 en los que observamos una diferencia en volumen de PFC entre ratas RHA-I y RLA-I, decidimos estudiar algunas de las posibles causas de esta diferencia. En este sentido, estudiamos dos parámetros que se creen están afectados en la esquizofrenia, la densidad de espinas dendríticas y el número de neuronas que expresan parvalbúmina (PV) en el PFC (estudio 5). De estos experimentos observamos que existe una diferencia significativa en la densidad de espinas entre ambas cepas, con un mayor porcentaje de espinas pequeñas en las RHA-I y mayor porcentaje de espinas grandes en las ratas RLA-I, mientras que el número de neuronas PV no presenta diferencias. Los datos recogidos añaden valor a la proposición de las ratas RHA-I como una herramienta útil en el estudio de algunos síntomas comportamentales y características neurobiológicas relevantes para la esquizofrenia.

الوصف (مترجم): The present Doctoral Dissertation gathers a series of studies in which we have tried to collect as much evidence as possible in a behavioral, neuroanatomical and molecular level with the aim of validating a new animal model for the study of schizophrenia-relevant symptoms. Such model is constituted by the Roman rats, two inbred strains of rats that have been psychogenetically selected by their good (RHA-I) versus extremely poor (RLA-I) acquisition of the two-way active avoidance task in the shuttle box, giving as a result two strains with well-defined and differential profiles in stress sensitivity, anxiety/fearfulness, impulsivity, vulnerability to drugs of abuse and phenotypes related to the dopaminergic, serotoninergic and glutamatergic neurotransmission systems. In the present work, we have carried out a number of experiments devoted to complete the characterization of the Roman rats in different behavioral, neurochemical and neuroanatomical phenotypes related to schizophrenia. We have conducted studies on behavioral paradigms relevant for schizophrenia, such as the prepulse inhibition of the acoustic startle response (PPI) and the latent inhibition (LI) effect (studies 1 and 2) in which we have obtained that RHA-I rats present an impaired PPI as well as LI, which suggest that these two phenotypes are somehow related and may share common underlying mechanisms. We have also tested the effects of a chronic environmental manipulation such as the isolation rearing of the animals (study 3), in (i) a behavioral level with an extensive battery of tests for schizophrenia-relevant phenotypes, (ii) a molecular level, with the analysis of the 5HT2A receptor density and (iii) an anatomical level with the volume estimation of three areas relevant for schizophrenia, such as the prefrontal cortex (PFC), the dorsal striatum (dST) and the hippocampus (HPC). We have observed that, while the behavioral profile has followed our initial expectations of more profound deficits induced by social isolation in the RHA-I rats, we have obtained paradoxical results on the binding studies and volume estimation analysis. Thus, although no differences have been observed in the 5HT2A receptor binding density, we have found between-strain differences in the volume of PFC, HPC and dST (RLA-I>RHA-I in every area), and a global effect of the treatment in the PFC volume. From the need of transferring the Roman rats from the animal facilities in our lab (where they have been maintained since 1993) to a new SPF animal facility within the Autonomous University of Barcelona, we carried out an embryo transfer procedure (study 4), and we phenotyped the 5th generation of animals from this new SPF colony. We observed that this new SPF colony of Roman rats display the typical between-strain differences in the G5 in every phenotype tested, both behavioral and hormonal. Lastly, according to the results obtained in study 3, in which we observed a difference in the mPFC volume between RHA-I and RLA rats, we decided to study some of the possible causes of this difference in the new SPF colony of Roman rats. In this regard, we studied two parameters that are thought to be altered in schizophrenia, the dendritic spine density and the number of parvalbumin-expressing (PV+) neurons in the PFC (study 5). We observed that there is a significant difference in spine density between the two strains, with a higher percentage of small spines in RHA-I rats and a higher percentage of large spines in the RLA-I rats, while the number of PV+ neurons was not different between the strains. The data gathered in the present Dissertation adds value to the proposition of the RHA-I rat strain as a useful tool for the study of some relevant symptoms and neurobiological features relevant to schizophrenia.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/565823Test

المؤلفون: Ollé Monge, Marta

المساهمون: University/Department: Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Medicina

مرشدي الرسالة: Cruz Carmona, María Jesús, Muñoz Gall, Xavier, Ferrer Sancho, Jaume Joan

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Asma ocupacional, Occupational asthma, Model animal, Modelo animal, Animal model, Immunologia, Immnulogía, Immunology, Ciències de la Salut

الوقت: 616.1

الوصف: El asma relacionada con el trabajo se define como el asma causada por la exposición a agentes que se encuentran en el lugar de trabajo, y es responsable de hasta un 25% de los casos de asma de inicio en la edad adulta. En los países industrializados es una de las causas más comunes de enfermedad respiratoria ocupacional. Concretamente, el asma ocupacional (AO) se atribuye a exposiciones en un particular ambiente ocupacional y no a estímulos fuera del lugar de trabajo, y puede estar inducido tanto por la sensibilización a un agente específico (AO inmunológico) como por exposición a sustancias irritantes (AO no inmunológico). Se han descrito más de 400 agentes causantes de AO y se dividen en agentes biológicos de alto peso molecular (APM) como proteínas, glicoproteínas y polisacáridos, y agentes químicos de bajo peso molecular (BPM) como sustancias químicas sintéticas, compuestos naturales, fármacos y metales. Las sales de persulfato son agentes químicos de BPM presentes en los productos decolorantes del cabello a concentraciones superiores al 60%. Estas sustancias son capaces de producir una sensibilización inmunológica y posterior enfermedad alérgica (dermatitis de contacto y asma bronquial), y son reconocidas como la principal causa de AO entre los profesionales de peluquería. Sin embargo, los detalles de la respuesta inmune implicada en el AO inducido por sales de persulfato no son bien conocidos, ya que parecen diferir de la respuesta típicamente alérgica de tipo 2. En algunos casos, se ha propuesto un mecanismo inmunológico mediado por inmunoglobulina-E (IgE) a pesar de las evidencias de una respuesta inmune tipo 1. En este sentido, un modelo murino de asma inducido por sales de persulfato, previamente validado, ha permitido ampliar el conocimiento de la fisiopatología implicada en este tipo de AO. La primera parte de la presente tesis se centra en el estudio de la persistencia de la respuesta asmática a sales de persulfato tras la sensibilización dérmica y tras una inhalación intranasal de persulfato amónico en ratones sensibilizados. Estos estudios mostraron una progresiva disminución de la respuesta asmática con el tiempo y los síntomas asmáticos llegaron incluso a desparecer, de forma parecida a lo que puede ocurrir en los pacientes con AO cuando cesa la exposición al agente causal. Sin embargo, no está claro que la completa eliminación de la exposición al agente sensibilizante sea la medida más eficiente ya que muchos pacientes permanecen sintomáticos. En este sentido, los ratones sensibilizados mostraron signos de sensibilización sistémica a largo plazo que les haría susceptibles a desarrollar una nueva respuesta asmática en el caso de una posible re-exposición al agente causal. El objetivo de la segunda parte de la tesis es evaluar el papel de la IgE y los mecanismos implicados en el desarrollo de la respuesta inmune en el AO causado por agentes de BPM, ya que el rol que desarrolla la IgE en este tipo de asma no está bien dilucidado. Mediante el bloqueo de la IgE, se pudieron estudiar los efectos del tratamiento con el anticuerpo monoclonal (AcM) anti-IgE en el modelo murino de AO inducido por sales de persulfato. La administración del AcM anti-IgE neutralizó completamente los niveles de IgE en suero y mejoró los síntomas asmáticos como la hiperrespuesta bronquial y los parámetros inflamatorios. Estos hallazgos sugieren la implicación de un mecanismo inmunológico donde la IgE puede tener un papel relevante para la fisiopatología del asma causada por agentes de BPM. En conclusión, los estudios de esta tesis arrojan conocimientos en la fisiopatología del AO a sales de persulfato y proponen una compleja interacción entre la respuesta inmune innata y una respuesta adaptativa mixta tipo1-tipo2.

الوصف (مترجم): The exposure to specific agents present in the workplace is thought to account for up to 25% of all cases of adult-onset asthma leading to work-related asthma, which is a common cause of work-related lung disease in the industrial world. Specifically, occupational asthma (OA) is attributable to exposure in a particular work environment and not to stimuli outside the workplace, induced by either sensitization to a specific substance (sensitizer-induced OA) or by exposure to an inhaled irritant at work (irritant-induced OA). More than 400 agents are reported to cause OA. They can be divided into biological agents of high molecular weight (HMW) (>5 KDa), such as proteins, glycoproteins and polysaccharides, and chemical agents of low molecular weight (LMW) (< 5 KDa) such as synthetic chemicals, natural compounds, drugs and metals. Persulfate salts are LMW chemical compounds present in hair bleaching products at concentrations up to 60%. They are capable of causing immunological sensitization and subsequent allergic disease (such as contact dermatitis and bronchial asthma), and are the main cause of OA among hairdressers. Nevertheless, no consensus has been reached regarding the details of the immune response involved in persulfate-induced OA, as it seems to differ from the typical allergic type2 immune response. In some cases, an IgE-mediated mechanism has been proposed despite evidence of a type 1 immune response. In this connection, a validated mouse model of persulfate-induced asthma has provided valuable knowledge about the physiopathology involved in this type of OA. The first part of this thesis focuses on the study of the persistence of the asthmatic response to persulfate salts after dermal sensitization (Chapter 1) and after specific persulfate challenge in sensitized mice (Chapter 2) in the mouse model of persulfate-induced asthma. These studies showed a progressive decrease in the asthmatic response over time and even found that the asthma symptoms may disappear, perhaps mirroring what happens in patients when the exposure to the causal agent ceases. Nevertheless, it is not clear that complete removal from the exposure to the sensitizing agent is the most efficient therapeutic approach, as many patients remain symptomatic despite avoidance of the causal agent. In this context, sensitized mice exhibited signs of long-term sensitization which would make them susceptible to developing a new asthmatic response when re-exposed to the sensitizing agent. The aim of the second part of this thesis was to explore the role of IgE and the mechanisms involved in the development of the immune response in this type of OA due to LMW agents. By neutralizing the IgE, we wanted to study the effects of anti-IgE monoclonal antibody (mAb) treatment in the established mouse model of persulfate-induced OA (Chapter 3). The administration of anti-IgE mAb completely neutralized serum IgE and improved asthma symptoms such as airway hyperresponsiveness (AHR) and inflammation patterns in the mouse model of OA, suggesting that an immunological mechanism is involved and that IgE may play an important role in the pathophysiology of the chemical-induced asthma. In conclusion, the studies included in his doctoral thesis shed light on the pathophysiology of OA due to persulfate salts and propose a complex interaction of innate and a mixed type1-type2 adaptative immune response.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/399518Test

المؤلفون: Segarra López, Sergi

المساهمون: University/Department: Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Medicina i Cirurgia Animals

مرشدي الرسالة: Leiva Repiso, Marta, Peña Giménez, Mª Teresa

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Model animal, Modelo animal, Animal model, Clorur de benzalconio, Cloruro de benzalconio, Benzalkonium chloride, Malaltia endotelial corneal, Enfermedad endotelial cornela, Corneal endothelial disease, Ciències de la Salut

الوصف: Objetivo: Hallar una dosis de cloruro de benzalconio (BAC) que, inyectada por vía intracameral en conejos, provoque daño selectivo sobre el endotelio corneal, sin afectar al resto de estructuras intraoculares, creando un modelo animal repetible y reproducible de enfermedad endotelial corneal. Materiales y métodos: Estudio ex vivo inicial con 40 ojos de conejo obtenidos post-mortem, que se dividieron en 8 grupos en función del compuesto inyectado por vía intracameral: control (sin inyección), BSS (solución salina balanceada), y concentraciones crecientes de BAC (0,005%, 0,01%, 0,025%, 0,05%, 0,1% y 0,2%). Estudio in vivo con 24 conejos, que fueron divididos en 4 grupos: BSS (grupo control) y BAC al 0,025%, 0,05% y 0,1%. Solamente se emplearon conejos sanos y ojos sin alteraciones. Las inyecciones intracamerales se efectuaron en el limbo esclerocorneal utilizando una aguja de 27G. con la ayuda de gafas lupa. En ambos estudios, se realizaron evaluaciones de exploración oftalmológica, paquimetría y microscopía especular (a las 0, 6, 24 y 48 horas en el estudio ex vivo; y a los 0, 2, 7 y 14 días en el estudio in vivo). A los 14 días, los conejos del estudio in vivo fueron eutanasiados. Al final de cada estudio, se realizaron tinciones vitales de las córneas para evaluar la morfología y viabilidad de las células endoteliales corneales (CECs). En el estudio in vivo también se hizo histopatología de los globos oculares. Resultados: Estudio ex vivo: Comparado con BSS, la densidad de las CECs comenzó a disminuir de manera significativa a la concentración de BAC 0,025%, mientras que la superficie de las CECs, el grado de edema corneal y el espesor corneal aumentaron de forma significativa con BAC al 0,05%, 0,005% y 0,1%, respectivamente. Concentraciones de BAC al 0,05% y superiores ocasionaron aumentos significativos en la mortalidad y el pleomorfismo de las CECs, en comparación con el control y BSS. Estudio in vivo: Comparado con el BSS, concentraciones de BAC al 0,025% y superiores provocaron aumento significativo en el grado de edema y espesor corneales, y en la superficie y el polimegatismo de las CECs. La mortalidad de las CECs fue significativamente mayor a partir de BAC 0,05%. La densidad y hexagonalidad de las CECs disminuyeron significativamente en todos los grupos de BAC. BAC al 0,1% ocasionó mayor número de casos de congestión conjuntival y úlceras corneales. La histopatología no reveló alteraciones significativas que afectasen al resto de las estructuras oculares tras la inyección de BAC. Conclusiones: La inyección intracameral de 0,1 ml de BAC al 0,05% en conejos provoca daño selectivo sobre el endotelio corneal, sin afectar al resto de estructuras intraoculares. Esta técnica, desarrollada y validada en un estudio ex vivo y otro in vivo, puede utilizarse para inducir un modelo animal repetible y reproducible de enfermedad endotelial corneal en conejos.

الوصف (مترجم): Objective: Find a dose of benzalkonium chloride (BAC) which, injected into the anterior chamber in rabbits, causes a selective damage on the corneal endothelium, without affecting the rest of intraocular structures and thus can be used to induce a repeatable and reproducible animal model of corneal endothelial disease. Material and Methods: First, an ex vivo study was performed using 40 rabbit eyes obtained postmortem, which were classified into 8 groups depending on the injected compound: Control (no injection), Balance salt solution (BSS), and increasing concentrations of BAC (0.005%, 0.01%, 0.025%, 0.05%, 0.1% and 0.2%). Secondly, an in vivo study was performed using 24 New Zealand White rabbits, which were classified into 4 groups: BSS (control group); and 0.025%, 0.05% and 0.1% BAC. Only healthy rabbits and eyes without abnormalities were used. The intracameral injections were made at the corneoscleral limbus using a 27G needle and magnifying loupes. In both studies, follow-up assessments of ophthalmological examination, pachymetry and specular microscopy were performed (at 0, 6, 24 and 48 hours in the ex vivo study; and at 0, 2, 7 and 14 days in the in vivo study). Fourteen days after injection, the rabbits from the in vivo study were euthanized. At the end of each study, corneas were vital-stained and evaluated under the light microscope in order to assess the morphology and viability of the corneal endothelial cells (CECs). In the in vivo study, histopathology of the eye globes was also performed. Results: Ex vivo study: Compared to BSS, the CECs density began to decrease significantly with 0.025% BAC, while the CECs area, the degree of corneal edema and the corneal thickness increased significantly with 0.05%, 0.005% and 0.1% BAC, respectively. BAC concentrations of 0.05% and above caused significant increases in CECs mortality and pleomorphism, compared to control and BSS. In vivo study: Compared to BSS, concentrations of 0.025% BAC and above caused a significant increase in the degree of corneal edema and corneal thickness, and in CECs area and polymeghetism. CECs mortality was significantly higher with 0.05% BAC and above concentrations. The CECs density and hexagonality decreased significantly in all BAC groups. A concentration of 0.1% BAC resulted in a higher number of cases presenting with conjunctival congestion and corneal ulcers. Histopathology revealed no significant alterations affecting the rest of the ocular structures after BAC injection. Conclusions: Intracameral injection of 0.1 ml 0.05% BAC in rabbits causes a selective damage on the corneal endothelium, without affecting the rest of intraocular structures. This technique, developed and validated in an ex vivo and an in vivo study, could be used to induce a repeatable and reproducible animal model of endothelial corneal disease in rabbits.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/393871Test

المؤلفون: Albertí i Fitó, Glòria

المساهمون: University/Department: Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Cirurgia

مرشدي الرسالة: Cáceres i Palou, Enric, García i Arnás, Félix, Navarro i Quilis, Antonio

المصدر: TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)

مصطلحات موضوعية: Laminectomia, Laminectomía, Laminectomy, Fibrosi, Fibrosis, Model animal, Modelo animal, Animal model, Ciències de la Salut

الوصف: La cirurgia del raquis lumbar ha augmentat substancialment amb el pas dels anys i això ha condicionat la pràctica de força estudis, tant clínics com experimentals, per millorar les tècniques, fer-les més eficients i segures pel pacient. Malgrat tot, aquestes intervencions presenten un índex de fracassos que es situen entre el 5 i el 50%, segons la literatura. Una de les possibles causes de fracàs és la fibrosi postquirúrgica. Sobre la fibrosi s’han fet nombrosos estudis, tant per acceptar que pot ser causa de dolor postoperatori com per rebutjar aquesta teoria. A més a més ha motivat un plegat de treballs que avaluen l’efectivitat i la necessitat de diferents mètodes que pretenen evitar la formació d’adherències entre aquesta formació fibrosa i les estructures neurals. Alhora, força estudis conclouen que el fracàs de la cirurgia lumbar és un problema multifactorial. Característiques individuals o factors operatoris tan mesurables com l’edat, el pes, el sexe, la duració de la cirurgia, el sagnat o la infecció poden interrelacionar-se i empobrir el resultat histològic i/o clínic de la cirurgia. Inspirats en aquesta bibliografia, dissenyàrem un estudi experimental on intervinguérem a 13 ovelles adultes per practicar laminectomies en els espais L3 i L5. Es recolliren els paràmetres quirúrgics, les troballes histològiques i les característiques individuals de cada animal. En primer lloc, compararen entre sí dos dels mètodes barrera més emprats i validats per les publicacions científiques, l’empelt de greix lliure i el gel antiadherent ADCON® - L. En segon lloc, observàrem el procés cicatricial d’una laminectomia lumbar sense implant i, a partir d’aquí, valorarem el possible impacte dels dos implants sobre la histologia del grup control. Tercer, ens plantejàrem si les dades histològiques, individuals i operatòries del nostre estudi es correlacionaven entre elles i, en quart lloc, avaluàrem el maneig dels animals i tot el conjunt del procediment experimental a fi d’explorar la validesa de l’ovella com model experimental en la cirurgia lumbar. Els nostres resultats conclouen que no hi ha diferències significatives en l’ús del greix o del gel antiadherent. La fibrosi postlaminectomia, tot i presentar-se sempre, no ocasiona cap compromís a les estructures neurals. El pes de l’animal pot influir en el resultat de la cirurgia, no en una variable concreta sinó en una conjunt d’elles. Finalment, podem dir que l’ovella pot ser un bon animal d’experimentació en la cirurgia lumbar.

الوصف (مترجم): Lumbar spine surgery has increased over the past few years. This has resulted in many experimental and clinical studies aimed to improve the surgical techniques, to make them more efficient and safe. Nevertheless, the index of failure of these procedures ranges from 5 to 50%, being postlaminectomy fibrosis one of the main potential complications. Different studies either support or refuse the idea that postsurgical pain is mainly due to fibrosis. Moreover, many studies have been conducted to explore the need and effectiveness of interventions that could prevent fibrosis and its penetration into the neural canal showing inconclusive results. Some authors believe that lumbar surgery failure has a multifactorial origin. Several studies conclude that individual differences as well as surgical factors like age, weight, gender, duration of surgery, bleeding or infection might be interrelated and could be responsible for negative clinical and histologic results. We designed an experimental animal study where a lumbar laminectomy at L3 and L5 was practiced to 13 sheep. Surgical parameters, histological findings and individual physical data were collected for each animal. First, we wanted to know if two of the most common materials used as barrier methods for fibrosis, a free fat graft and the antiadhesion gel ADCON® - L, would result in different outcomes. Second, we wanted to explore differences in the healing process and the histology between the aforementioned methods and controls where no barrier methods were applied. Third, we wanted to know if histological, individual and surgical variables in our study correlated to each other. Fourth, we explored the scientific validity and the practicality of the sheep as an experimental model in lumbar laminectomy. Our results concluded that there are no significant differences between the free fat graft and the antiadhesion barrier gel. Postlaminectomy fibrosis was present in all cases and did not cause any significant adherence in the neural canal. The multivariate statistical analysis suggests that body weight might influence different parameters related to surgical outcome. From a practical point of view, our study indicates that the domestic sheep could be a good animal model for lumbar laminectomy in human beings.

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الوصول الحر: http://hdl.handle.net/10803/381247Test