المؤلفون: E. N. Lipets, F. I. Ataullakhanov, M. A. Panteleev

المصدر: Онкогематология, Vol 10, Iss 3, Pp 73-77 (2015)

مصطلحات موضوعية: integral coagulation tests, hypercoagulation, thrombosis, d-dimers, fibrinopeptide, antithrombin complex, Diseases of the blood and blood-forming organs, RC633-647.5

الوصف: Thrombosis is a fatal hemostatic disorders occurring in various conditions ranging from pregnancy and surgery to cancer, sepsis and heart attack. Despite the availability of different anticoagulants and accumulated clinical experience, proving their effectiveness, thrombosis remains a major cause of morbidity and mortality. This is largely due to the fact that conventional laboratory coagulation tests are not sufficiently sensitive to the hypercoagulable state, and they are difficult to use for assessing the risk of thrombosis. Specific molecular markers (D-dimers, fibrinopeptide, thrombin-antithrombin complex) are more effective, but also have a large number of disadvantages. A possible solution is the use of integrated test, which simulate in vitro the majority of the physiological coagulation processes. In the first part of this paper the biochemical processes that cause the risk of thrombosis were discussed.

وصف الملف: electronic resource

العلاقة: https://oncohematology.abvpress.ru/ongm/article/view/157Test; https://doaj.org/toc/1818-8346Test; https://doaj.org/toc/2413-4023Test

الوصول الحر: https://doaj.org/article/24c3687f9f0943c6a8f8828a4733481bTest

مصطلحات موضوعية: альфа-2-макроглобулин, диагностика, MALDI-TOF масс-спектрометрия, serum biomarkers, MALDI-TOF mass spectrometry, quantitative mass spectrometry, количественная масс-спектрометрия, сывороточные биомаркеры, sepsis, fibrinopeptide a, сепсис, фибринопептид А, inflammation, diagnostics, воспаление, alpha-2-macroglobulin

الوصف: Тема выпускной квалификационной работы: «Применение количественной MALDIмасс-спектрометрии для определения концентрации альфа-2-макроглобулина и фибринопептида А в сыворотке крови человека». Данная работа посвящена разработке метода количественной оценки концентраций Ñ‚Ð°ÐºÐ¸Ñ Ð¼Ð°Ñ€ÐºÐµÑ€Ð¾Ð² воспаления, как альфа-2-макроглобулин и фибринопептид А в цельной сыворотке крови с помощью MALDI-TOFмасс-спектрометрии с применением изотопно-Ð¼ÐµÑ‡ÐµÐ½Ð½Ñ‹Ñ Ð²Ð½ÑƒÑ‚Ñ€ÐµÐ½Ð½Ð¸Ñ ÑÑ‚Ð°Ð½Ð´Ð°Ñ€Ñ‚Ð¾Ð². В результате работы были идентифицированы пептиды, Ð²Ñ Ð¾Ð´ÑÑ‰Ð¸Ðµ в состав Ñ€Ð°ÑÑÐ¼Ð°Ñ‚Ñ€Ð¸Ð²Ð°ÐµÐ¼Ñ‹Ñ Ð¼Ð°Ñ€ÐºÐµÑ€Ð¾Ð², и получены изотопно-меченые стандарты из ÑÐ¸Ð½Ñ‚ÐµÐ·Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð½Ñ‹Ñ Ð°Ð½Ð°Ð»Ð¾Ð³Ð¾Ð². Было определено оптимальное время детекции Ð¸ÑÑÐ»ÐµÐ´ÑƒÐµÐ¼Ñ‹Ñ ÑÐ¾ÐµÐ´Ð¸Ð½ÐµÐ½Ð¸Ð¹, а также установлены особенности протекания ферментативной реакции трипсина с альфа-2-макроглобулином и со вторым по значимости ингибитором протеаз –альфа-1-антитрипсином в сыворотке крови человека. Таким образом, разработан и верифицирован метод количественной оценки ÑÑ‹Ð²Ð¾Ñ€Ð¾Ñ‚Ð¾Ñ‡Ð½Ñ‹Ñ ÑƒÑ€Ð¾Ð²Ð½ÐµÐ¹ альфа-2-макроглобулина и фибринопептида А с применением ÑÐ¾Ð²Ñ€ÐµÐ¼ÐµÐ½Ð½Ñ‹Ñ Ð¼Ð°ÑÑ-ÑÐ¿ÐµÐºÑ‚Ñ€Ð¾Ð¼ÐµÑ‚Ñ€Ð¸Ñ‡ÐµÑÐºÐ¸Ñ Ð¿Ð¾Ð´Ñ Ð¾Ð´Ð¾Ð², позволяющий проводить анализ в сыворотке крови без её предварительного фракционирования. Также продемонстрирована возможность совместного измерения Ð´Ð²ÑƒÑ Ð±Ð¸Ð¾Ð¼Ð°Ñ€ÐºÐµÑ€Ð¾Ð² в Ñ Ð¾Ð´Ðµ одного эксперимента. Предложенный в работе метод обладает рядом преимуществ, так как является более простым в реализации по сравнению со стандартными методами количественного анализа ÑÑ‹Ð²Ð¾Ñ€Ð¾Ñ‚Ð¾Ñ‡Ð½Ñ‹Ñ Ð¼Ð°Ñ€ÐºÐµÑ€Ð¾Ð², а также более быстрым, так как общее время анализа в настоящий момент составляет порядка 1 часа от момента получения образца сыворотки крови пациента до количественной оценки уровней Ð¸Ð·ÑƒÑ‡Ð°ÐµÐ¼Ñ‹Ñ ÑÐ¾ÐµÐ´Ð¸Ð½ÐµÐ½Ð¸Ð¹.
The topic of the graduation work: “Application of quantitative MALDI mass spectrometry to determine the concentration of alpha-2-macroglobulin and fibrinopeptide A in human serum". This work is devoted to the development of a method for the quantitative assessment of the concentrations of such inflammatory markers as alpha-2-macroglobulin and fibrinopeptide A in blood serum using MALDI-TOF mass spectrometry with an isotopically labeled internal standards. As a result of the work, the peptides included in the considered markers were identified, and isotopically labeled standards were obtained from the synthesized analogs. The optimal detection time for the considered compounds was determined, and the features of the enzymatic reaction of trypsin with alpha-2-macroglobulin and alpha-1-antitrypsin -the second most important protease inhibitor in human serum -were established. In conclusion, the method for quantitative assessment of serum levels of alpha-2-macroglobulin and fibrinopeptide A using modern mass spectrometric approaches has been developed and verified. It allows analysis in blood serum withoutitspreliminary fractionation. The proposed methodis simpler to implement in comparison with standard methods of quantitative analysis of serum markers, and also faster, since the total analysis time is about 1 hour from the moment of obtaining a sample of the patient's blood serum to quantifying the levels of the considered compounds.

الوصول الحر: https://explore.openaire.eu/search/publication?articleId=doi_________::3edf7b4213b848a3809d2bbd9c78407dTest