Тема вÑпÑÑкной квалиÑикаÑионной ÑабоÑÑ: «ÐÑименение колиÑеÑÑвенной MALDIмаÑÑ-ÑпекÑÑомеÑÑии Ð´Ð»Ñ Ð¾Ð¿ÑÐµÐ´ÐµÐ»ÐµÐ½Ð¸Ñ ÐºÐ¾Ð½ÑенÑÑаÑии алÑÑа-2-макÑоглобÑлина и ÑибÑинопепÑида Рв ÑÑвоÑоÑке кÑови Ñеловека». ÐÐ°Ð½Ð½Ð°Ñ ÑабоÑа поÑвÑÑена ÑазÑабоÑке меÑода колиÑеÑÑвенной оÑенки конÑенÑÑаÑий ÑÐ°ÐºÐ¸Ñ Ð¼Ð°ÑкеÑов воÑпалениÑ, как алÑÑа-2-макÑоглобÑлин и ÑибÑинопепÑид Рв ÑелÑной ÑÑвоÑоÑке кÑови Ñ Ð¿Ð¾Ð¼Ð¾ÑÑÑ MALDI-TOFмаÑÑ-ÑпекÑÑомеÑÑии Ñ Ð¿Ñименением изоÑопно-меÑеннÑÑ Ð²Ð½ÑÑÑÐµÐ½Ð½Ð¸Ñ ÑÑандаÑÑов. Ð ÑезÑлÑÑаÑе ÑабоÑÑ Ð±Ñли иденÑиÑиÑиÑÐ¾Ð²Ð°Ð½Ñ Ð¿ÐµÐ¿ÑидÑ, Ð²Ñ Ð¾Ð´ÑÑие в ÑоÑÑав ÑаÑÑмаÑÑиваемÑÑ Ð¼Ð°ÑкеÑов, и полÑÑÐµÐ½Ñ Ð¸Ð·Ð¾Ñопно-меÑенÑе ÑÑандаÑÑÑ Ð¸Ð· ÑинÑезиÑованнÑÑ Ð°Ð½Ð°Ð»Ð¾Ð³Ð¾Ð². ÐÑло опÑеделено опÑималÑное вÑÐµÐ¼Ñ Ð´ÐµÑекÑии иÑÑледÑемÑÑ Ñоединений, а Ñакже ÑÑÑÐ°Ð½Ð¾Ð²Ð»ÐµÐ½Ñ Ð¾ÑобенноÑÑи пÑоÑÐµÐºÐ°Ð½Ð¸Ñ ÑеÑменÑаÑивной ÑеакÑии ÑÑипÑина Ñ Ð°Ð»ÑÑа-2-макÑоглобÑлином и Ñо вÑоÑÑм по знаÑимоÑÑи ингибиÑоÑом пÑоÑеаз âалÑÑа-1-анÑиÑÑипÑином в ÑÑвоÑоÑке кÑови Ñеловека. Таким обÑазом, ÑазÑабоÑан и веÑиÑиÑиÑован меÑод колиÑеÑÑвенной оÑенки ÑÑвоÑоÑоÑнÑÑ ÑÑовней алÑÑа-2-макÑоглобÑлина и ÑибÑинопепÑида Ð Ñ Ð¿Ñименением ÑовÑеменнÑÑ Ð¼Ð°ÑÑ-ÑпекÑÑомеÑÑиÑеÑÐºÐ¸Ñ Ð¿Ð¾Ð´Ñ Ð¾Ð´Ð¾Ð², позволÑÑÑий пÑоводиÑÑ Ð°Ð½Ð°Ð»Ð¸Ð· в ÑÑвоÑоÑке кÑови без ÐµÑ Ð¿ÑедваÑиÑелÑного ÑÑакÑиониÑованиÑ. Также пÑодемонÑÑÑиÑована возможноÑÑÑ ÑовмеÑÑного измеÑÐµÐ½Ð¸Ñ Ð´Ð²ÑÑ Ð±Ð¸Ð¾Ð¼Ð°ÑкеÑов в Ñ Ð¾Ð´Ðµ одного ÑкÑпеÑименÑа. ÐÑедложеннÑй в ÑабоÑе меÑод Ð¾Ð±Ð»Ð°Ð´Ð°ÐµÑ ÑÑдом пÑеимÑÑеÑÑв, Ñак как ÑвлÑеÑÑÑ Ð±Ð¾Ð»ÐµÐµ пÑоÑÑÑм в ÑеализаÑии по ÑÑÐ°Ð²Ð½ÐµÐ½Ð¸Ñ Ñо ÑÑандаÑÑнÑми меÑодами колиÑеÑÑвенного анализа ÑÑвоÑоÑоÑнÑÑ Ð¼Ð°ÑкеÑов, а Ñакже более бÑÑÑÑÑм, Ñак как обÑее вÑÐµÐ¼Ñ Ð°Ð½Ð°Ð»Ð¸Ð·Ð° в наÑÑоÑÑий Ð¼Ð¾Ð¼ÐµÐ½Ñ ÑоÑÑавлÑÐµÑ Ð¿Ð¾ÑÑдка 1 ÑаÑа Ð¾Ñ Ð¼Ð¾Ð¼ÐµÐ½Ñа полÑÑÐµÐ½Ð¸Ñ Ð¾Ð±ÑазÑа ÑÑвоÑоÑки кÑови паÑиенÑа до колиÑеÑÑвенной оÑенки ÑÑовней изÑÑаемÑÑ Ñоединений. The topic of the graduation work: âApplication of quantitative MALDI mass spectrometry to determine the concentration of alpha-2-macroglobulin and fibrinopeptide A in human serum". This work is devoted to the development of a method for the quantitative assessment of the concentrations of such inflammatory markers as alpha-2-macroglobulin and fibrinopeptide A in blood serum using MALDI-TOF mass spectrometry with an isotopically labeled internal standards. As a result of the work, the peptides included in the considered markers were identified, and isotopically labeled standards were obtained from the synthesized analogs. The optimal detection time for the considered compounds was determined, and the features of the enzymatic reaction of trypsin with alpha-2-macroglobulin and alpha-1-antitrypsin -the second most important protease inhibitor in human serum -were established. In conclusion, the method for quantitative assessment of serum levels of alpha-2-macroglobulin and fibrinopeptide A using modern mass spectrometric approaches has been developed and verified. It allows analysis in blood serum withoutitspreliminary fractionation. The proposed methodis simpler to implement in comparison with standard methods of quantitative analysis of serum markers, and also faster, since the total analysis time is about 1 hour from the moment of obtaining a sample of the patient's blood serum to quantifying the levels of the considered compounds.
