LC-MS/MS method development for anti-oxidative biomarkers
| العنوان: | LC-MS/MS method development for anti-oxidative biomarkers |
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| المؤلفون: | Gomes, Tiago Miguel Marques Vieira |
| المساهمون: | Tampio, Janne, Duarte, Noélia Maria da Silva Dias, Repositório da Universidade de Lisboa |
| سنة النشر: | 2022 |
| مصطلحات موضوعية: | Isoprostanoids, 8-Epi-prostaglandina F2 alfa, 8-iso-prostaglandina E2, High performance liquid chromatography, Mass spectrometry, Oxidative stress, Lipid peroxidation, Mestrado integrado - 2022, Ciências da Saúde |
| الوصف: | Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia. |
| الوصف (مترجم): | O stress oxidativo prejudica a saúde humana por ser um fator crítico no desenvolvimento e progressão de doenças crónicas. Através da peroxidação lipídica, ocorrem mudanças dentro da membrana celular, levando ao dano total da célula. Os isoprostanóides são metabolitos secundários da peroxidação lipídica que podem ser quantificados e utilizados como biomarcadores de stress oxidativo. No decurso deste projeto de Erasmus realizado na University of Eastern Finland sobre a supervisão do professor Janne Tampio de 7 de Janeiro a 7 de Abril de 2022, foi desenvolvido um método de cromatografia líquida de alta eficiência acoplado à espectrometria de massa para identificação e quantificação da 8-epi-prostaglandina F2α (8-epi-PGF2α) e 8-iso-prostaglandina E2 (8-iso-PGE2). Foi usado um sistema de cromatografia líquida Agilent 1200 Series acoplado ao Agilent 6495 Triple Quad. As condições analíticas foram estudadas e otimizadas e os respectivos iões precursores e produtos foram escolhidos. O modo de aquisição MRM (multiple reaction monitoring) foi utilizado para identificação e quantificação dos compostos, pois permite um aumento significativo na especificidade e sensibilidade do método. Três transições foram consideradas para cada composto. O sinal mais intenso para o ião produto foi selecionado para a quantificação (MRM1), as demais transições serviram como verificação de identificação para o composto (MRM2 e MRM3). A validação do método foi efetuada avaliando os seguintes parâmetros: repetibilidade do equipamento, limite de deteção e quantificação, exatidão e linearidade de acordo com os critérios de aceitação da Decisão da Comissão Europeia 2002/657/EC sobre o desempenho de métodos analíticos e a interpretação dos resultados. Oxidative stress harms human health by being a critical factor in the development and progression of chronic diseases. Through lipid peroxidation, changes within the cell membrane occur, leading to overall cell damage. Isoprostanoids are secondary metabolites of lipid peroxidation that can be quantitated and used as oxidative stress biomarkers. On the course of this Erasmus project done in the University of Eastern Finland under the supervision of professor Janne Tampio between 7th of January and 7th of April, a high-performance liquid chromatography in tandem with mass spectrometry (HPLC-MS/MS) method was partially developed and validated to identify and quantify both 8-epi-prostaglandin F2α (8-epi-PGF2α) and 8-iso-prostaglandin E2 (8-iso-PGE2). An Agilent 1200 Series Liquid Chromatography System coupled with Agilent 6495 Triple Quad was used. Analytical conditions were studied and optimized and the respective product and precursor ions were chosen. MRM (multiple reaction monitoring) was used to identify and quantitate the compounds, as it allows for increased specificity and sensitivity of the method. Three transitions were considered for each compound. The most intense signal for the product ion was selected for quantification (MRM1), the other transitions were identification checks for the compound (MRM2 and MRM3). Method validation was performed by repeatability of equipment, limit of detection and quantification, accuracy and linearity, in line with the Commission decision 2002/657/EC acceptance criteria. University of Eastern Finland. |
| ملاحظة حول المحتويات: | TID:203152069 |
| وصف الملف: | application/pdf |
| اللغة: | English |
| الإتاحة: | http://hdl.handle.net/10451/58070Test |
| حقوق: | open access |
| رقم الانضمام: | rcaap.com.ul.repositorio.ul.pt.10451.58070 |
| قاعدة البيانات: | RCAAP |
| الوصف غير متاح. |