دورية أكاديمية
P1 transdüksiyon yöntemi ile birden fazla gen bakımından mutant olan Escherichia coli suşlarının elde edilmesi ; P1 transduction method to construct Escherichia coli mutant strains lacking more than one gene
| العنوان: | P1 transdüksiyon yöntemi ile birden fazla gen bakımından mutant olan Escherichia coli suşlarının elde edilmesi ; P1 transduction method to construct Escherichia coli mutant strains lacking more than one gene |
|---|---|
| المؤلفون: | DİBEK, Esra, SEZER KÜRKÇÜ, Merve, ÇİFTÇİ, Begüm Hazar, ÇÖL, Bekir |
| المصدر: | Volume: 9, Issue: 1 110-119 ; 2147-3129 ; 2147-3188 ; Bitlis Eren Üniversitesi Fen Bilimleri Dergisi |
| بيانات النشر: | Bitlis Eren Üniversitesi Bitlis Eren University |
| سنة النشر: | 2020 |
| المجموعة: | DergiPark Akademik (E-Journals) |
| مصطلحات موضوعية: | P1 faj,transdüksiyon,Escherichia coli,ikili mutant, P1 phage,transduction,Escherichia coli,double mutants |
| الوصف: | Bakterilerdegen fonksiyonlarının bulunması ve fenotipik çalışmalarının yapılabilmesi içinmutantların oluşturulması gerekmektedir. Bazı durumlarda, birden fazla genaçısından mutant olan suşlar oluşturulmalıdır çünkü bazı spesifik aktivitelerbirden fazla gen tarafından kodlanmaktadır. P1 fajı, Escherichia coli'de, ikili, üçlü veya çoklu mutantlarınoluşturulmasında başvurulan, genelleştirilmiş bir transdüksiyon fajıdır. Bufaj, gelişimi sırasında, E. coli kromozomununparçalarını (her bir partikülde genomun yaklaşık % 2'si olmak üzere), rastgelebir şekilde faj kafasına paketleyebilmektedir. E. coli DNA’sını içeren fajlar, içerdikleri DNA parçalarını, alıcıbakteri hücrelerine enjekte edebilmektedir. Verici ve alıcı DNA bölgeleriarasındaki benzerlik ve seçici bir markır yardımıyla, transdüktanlar’ın eldeedilmesi mümkün olmaktadır. Transdüksiyon için tercihen, P1 fajının, virülanbir türevi (P1vir) kullanılmaktadır, çünkü bu form, bakterinin genomuna entegreolamamaktadır. Fajın bu özelliğinin kullanılmasıyla geliştirilen tekniklerdenbirisi, P1 transdüksiyon tekniği olarak adlandırılmaktadır. Rekombinasyonteknolojisinde kullanılan bu teknik, E.coli genomuna ait DNA parçalarının, suşlar arasında taşınmasınısağlamaktadır.Buçalışmada, optimize ettiğimiz P1 transdüksiyon metodolojisinin, deneysel akışve yeterli detaylarla birlikte, Türk bilim camiasına, ana dilimizde sunulmasıamaçlanmıştır. Bunun için, KEIO koleksiyonundan elde edilen dört adet tekli genmutantları kullanılmıştır. İlk olarak, kanamisin (Kan) duyarlı bir alıcı suşoluşturmak için, her bir mutant suştan, Kan gen kasetleri çıkarılmıştır. KanRkasetlerine sahip diğer dört adet KEIO mutant suşu, donör suşlar olarakkullanılmış ve P1 fajı bu suşlar ile kültür edilerek, lizatlar elde edilmiştir.Bu lizatlar ve alıcı suşlar daha sonra, lizatlardaki fazjların içerdikleri DNAparçalarını, alıcı suş genomuna entegre edebilmesi için, transdüksiyona tabiitutulmuştur. Kanamisin ile seleksiyon sonucu, yeni mutant suşlar olan ikilimutantlar elde edilmiştir. ... |
| نوع الوثيقة: | article in journal/newspaper |
| وصف الملف: | application/pdf |
| اللغة: | Turkish |
| العلاقة: | https://dergipark.org.tr/tr/download/article-file/995731Test; https://dergipark.org.tr/tr/pub/bitlisfen/issue/53085/588763Test |
| DOI: | 10.17798/bitlisfen.588763 |
| الإتاحة: | https://doi.org/10.17798/bitlisfen.588763Test https://dergipark.org.tr/tr/pub/bitlisfen/issue/53085/588763Test |
| رقم الانضمام: | edsbas.2A1CBE58 |
| قاعدة البيانات: | BASE |
| DOI: | 10.17798/bitlisfen.588763 |
|---|